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水浴鍋用于芋頭多酚氧化酶分離。

返回列表 來源:未知 發布日期:2021-08-16 09:07【

    芋頭(Colocasia esculenta (L.) S.chott)屬于塊莖植物,富含淀粉、酚類化合物、蛋白質、多糖、維生 素和多種礦物質,具有健脾消食、預防齲齒、降低 膽固醇水平、提高機體免疫力、改善便秘等諸多生理功能。近年來,鮮切是食品工業重要加工方式之一。超濾離心管(10 kDa) 德國Millipore公司; AKTA蛋白質層析純化系統 美國General Elecric公司; DEAE-Sepharose Fast Flow(DEAE-SFF)層析柱 英國 Waterman公司;Superdex G-75凝膠柱 瑞典Amersham Pharmacia Biotech公司;CR22N/21N冷凍離心機 日本 日立公司;UV-5500紫外-可見分光光度計 上海元析 儀器有限公司;GJ-18S冷凍干燥機 北京松源華興科 技發展公司;低溫冰箱(-80 ℃) 日本Sanyo公司; WH-600-LCD型電泳儀 北京市六一儀器廠;HHS11-2型數 顯式電熱恒溫水浴鍋 上海博迅實業有限公司醫療設 備廠;Biodoc-IT 220普通凝膠成像系統 Analytik Jena 美國有限責任合伙公司;iMark全自動酶標儀 美國 Bio-Rad公司;BL35A11多功能料理機 中國美的集團股 份有限公司;XHF-D勻漿機 寧波新芝生物科技股份有限 公司;101FA-2電熱鼓風干燥箱 上海一恒科學儀器有限 公司;Delta 320 pH計 瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司。

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    利用DEAE-SFF柱將超濾處理后的粗酶液進行分離 純化。將超純水、1 mol/L NaCl溶液、0.1 mol/L磷酸鹽緩 沖溶液(pH 6.8)、體積分數20%的乙醇溶液過0.22 μm 膜備用。先利用過膜的超純水清洗系統和DEAE-SFF層析 柱,再使用0.1 mol/L磷酸鹽緩沖溶液(pH 6.8)清洗系統 和平衡柱子。超濾后樣品經過0.22 μm膜過濾后上樣,洗 脫流速為1.0 mL/min,收集速度5 mL/管,并按收集順序 從標記管號,測定所收集各峰組分的PPO活性和蛋白質 濃度。用0.1 mol/L磷酸鹽緩沖液將PPO活性測定體系的pH 值范圍調整到4.0~8.0之間,并按照0.4的pH值衡量單位 以確定PPO的最適反應pH值。以鄰苯二酚溶液為底物, 待鄰苯二酚溶液在指定pH值(pH 4~8)平衡后,迅速加 入PPO,測定其420 nm的吸光度,后續實驗均采用最佳 pH值。





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