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脈動真空滅菌滅菌效果驗證

返回列表 來源:未知 發布日期:2023-09-04 08:40【

備注說明 :下面滅菌效果驗證中使用的 3 種無菌檢驗用培養基分別按各自培養基的使用說明配制并分裝在 6 分管中,每支分裝 6mL~8mL,蓋上膠塞經 116℃,1800s 高壓滅菌后無菌檢驗合格備用。

 

方法一 :無菌(純粹)檢驗法

檢驗過程:將高壓滅菌后的 MEM 溶液(在室溫放置 24h,然后移至層流罩(局百環境)下用 5mL 無菌注射器取樣,并分別接種硫乙醇酸鹽流體培養基 2 支、胰酪大豆胨液體培養基1 支和酪胨瓊脂培養基 2 支,每支接種 0.2mL,分別在 25℃(硫乙醇酸鹽流體培養基、胰酪大豆胨液體培養基和酪胨瓊脂培養基各一支)和 37℃(硫乙醇酸鹽流體培養基和酪胨瓊脂培養基各一支)條件下培養 7 天,每天觀察并記錄檢驗結果。檢驗結果 :觀察 7 天,無菌檢驗培養基中均無菌落生長,無菌檢驗合格。

 

方法二 :細胞培養檢驗法

檢驗過程:在高壓滅菌后的 MEM 溶液中加 10% 胎牛血清后貼壁培養 MDBK 細胞,并 37℃培養 3 天,每天觀察細胞是否染菌。檢驗結果:3 天后細胞生長良好,顯微鏡鏡檢細胞輪廓清晰,視野干凈,未見雜菌。

 

方法三 :生物指示劑驗證法

在高壓滅菌 MEM 溶液時選擇 3 個溫度可能最低的點分別放置生物指示劑 , 常用的生物指示劑嗜熱脂肪芽孢桿菌Bacillusstereathernophilus,其常規微生物耐熱參數 D 值為 121℃(1.5min~3.0min)。一同滅菌,滅菌結束后將滅菌后的生物指示劑及時取出并置于 56℃培養箱中培養 48h,隨后取出培養后的生物指示劑,觀察安瓿的內容物顏色,并與生物指示劑照片進行比較觀察。檢驗結果 :48h 培養后的生物指示劑顏色呈紫紅色且澄清,說明該滅菌過程可有效殺滅孢子菌。

 

驗證結果重復上述驗證,連續三次,結果均符合要求。


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